产品展示
PRODUCT DISPLAY
技术支持您现在的位置:首页 > 技术支持 > LC-MS联用分析操作注意事项
LC-MS联用分析操作注意事项
  • 发布日期:2018-11-19      浏览次数:1003
    • 1、酸性物质适合做负离子检测,所以流动相偏碱性较合适,促使其解离,碱性物质适合做正离子检测,流动相中适当的加入酸,促使其形成正离子,流动相中适当加一些醋酸钠(或者醋酸铵),可形成加钠的正离子或者加铵的正离子。

        推荐使用的流动相和添加剂:

        有机溶剂:反相:乙腈/甲醇/乙醇/异丙醇/二氯甲烷

        正相:吐仑/己烷/苯/环己烷/四氯化碳

        缓冲液: 乙酸铵/甲酸铵

        酸:甲酸/乙酸/三氟yi酸(正离子)

        碱:氨水

        不推荐使用/尽量不用的:

        有机溶剂: 四氢fu喃

        缓冲液:磷酸盐/柠檬酸盐/碳酸盐

        酸: 硫酸/磷酸/盐酸/高氯酸/磺酸

        碱:季胺/强碱/三乙胺

        其他:清洁剂/表面活性剂/离子对试剂/不挥发的盐

        2、糖苷类的物质在做FAB和esi(+)时,峰往往比峰要强,此为经验,原因只是推测可能和天然产物的提取过程有关;盐类化合物如盐酸盐、硫酸盐在质谱中酸的部分一般不会出现;二羧酸盐(esi负离子模式)除了分子离子峰外,会出现连续掉44的两个峰,为失去羧酸根的离子,这三个峰非常特征,但是会受锥孔电压的影响,调低电压谱图会更漂亮。

        3、胺类物质做esi质谱时要注意进样量要少,因为很容易离子化,不易冲洗干净,会影响后面样品的测定。像三乙胺在液质联用时不能用于调节流动相pH值。若不慎引入三乙胺,在正离子检测时总会出现很强的102峰(三乙胺的)。

        4、质谱用水一般用娃哈哈纯净水之类的就很好;质谱用甲醇和乙腈,换用了很多品牌,发现Merck的还是稍微好一些;Finnigan用的氮气不一定要用到液氮瓶,用普通的钢瓶气就可以了,可能还省钱些;建议大家买一个好一点的手电筒和一个放大镜,手电筒用来看源里面,放大镜看你割的毛细管平整。

        5、质谱的基线其实跟液相的紫外检测器和荧光检测器一样,基线高的原因不外乎内部和外部的原因。

        1)你选择的流动相在质谱的响应比较高,比如水相比较多的时候,噪音比较大些;还有如果盐含量比较大的时候,噪音更大些。

        2)检测器的灵敏度越高的时候,噪音应该越高。如果质谱的污染比较严重时,基线肯定比较高。比如离子阱检测器,用得久了,阱中的离子就会增多,一方面降低了质谱的灵敏度,另一方面增加了基线噪音。

        3)质谱的基线很多时候还跟你选择的离子宽度有关。比如你作选择离子扫描的时候,基线就低些。你作选择反应扫描的时候,离子宽度不要选得太宽,太宽噪音就高些。

        4)多级质谱一般做二级或三级质谱,基线噪音就低很多。

        6.质谱维护经验交流:做样前-检查氮气,流动相,质谱仪的真空度,毛细管温度…

        1)不用直接进样(容易污染离子源)。

        2) 做联用时分流(a可以使用常规柱,b缩短分析时间,c 延长质量分析器寿命)。

        3) 使用在线切换阀,降前每个样品的前后1-2分钟的流动相切入废液(避免样品中的盐进入质谱,做Sequence时可以把平衡柱子的流动相切入废液)。

        4 )开始联用前,直接运行质谱数分钟,可以先将温度(毛细管温度和离子源温度(APCI))加热到预设定值(如果是APCI源还可以避免将烧掉heater)。

        5) 待机时将切换阀置于waste,避免刚开液相时将流动相打入离子源。

        6) 关机前毛细管的温度先降下来,稳定一段时间后再关闭电源,避免风扇停止转动后毛细管外围的热量向里扩散,容易引起内部线路及电子元器件老化加速。

        7) 每天清理毛细管口外部,擦洗干净,每次停机时注意清洗Skimmer,用无尘擦拭纸,kimberly那种。

        8 )如果用的是钢瓶而且天天做样的话,将两个钢瓶并联,当然,一月不做一次的话就算了。

        9) 做定量时注意离子源喷针的具体位置,否则标准曲线就不能用了。

        10)不要不经过柱子分离进行定量分析,结果不可靠(竞争性抑制目标分子离子化)。

        11 )如果是负离子检测的话,可以相流动相中加入少量异丙醇。

        12) 不要使用不挥发性盐,如果使用挥发性盐,但浓度不要超过20mmol/l。

        13) 需要使用酸的情况下可以用甲酸,乙酸,三氟yi酸可以用,但能用甲酸或乙酸时就别用TFA。

        7、理论上液质联用禁止使用任何不挥发性的缓冲盐,如果需要尽量使用诸如乙酸氨等挥发性盐,浓度不要超过20mmol/l。

        对于不挥发性的缓冲盐,如果你的仪器有吹扫捕集的话也可使用,但一定要小心。万不得已也不要用,首先有不挥发盐是得不到好的离子流的,其次盐留在质谱中很难除掉,除非停机清洗,不然一直会影响其他样品的分析。

        可以找质谱友好的条件来做液质联机,例如色谱条件为20mM磷酸盐的水/乙腈流动相,做液质联机的时候就可以用醋酸铵代替,然后用醋酸调节pH值与磷酸盐的一致即可。

        除了难挥发的盐,三乙胺、表面活性剂、还有高浓度(>0.5%)的TFA,都对质谱不好,液质联用的流动相中应该避免。

       

    联系方式
    • 电话

      86-010-82382578

    • 传真

      86-010-82382580

    • 手机

      15810002992

    在线客服

    化工仪器网

    推荐收藏该企业网站
    扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
    访问手机站